產(chǎn)品屬性：

需要而未提供的試劑和器材：

1. 產(chǎn)品僅用于科研標準規(guī)格酶標儀

2. 高速離心機

3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱

4. 干凈的試管和Eppendof管

5. 系列可調節(jié)移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時，用多通道移液器

6. 蒸餾水，容量瓶等。

標本要求：

1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

備試劑與收集血樣：

1.  收集標本：血清、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測， 2-8 ℃ 保存48 小時；更長時間須冷凍（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反復凍融。

2.  標準品液配制：使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管，管加標本稀釋液 900ul ，第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反復作對倍稀釋，從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。

3.  10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋（ 示例： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）。

4.  洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋（示例：1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水）

檢測程序：

1.  加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

樣本實驗前準備：

ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。

（1）血清

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

（2）血漿：

應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

（3）尿液：

用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

（4）細胞培養(yǎng)上清：

檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。

（5）培養(yǎng)細胞

檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

（6）組織標本

切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

假定蛋白LOC677340 試劑盒二氫愈創(chuàng)木脂異酯  97%2,4-二苯  98%

假定蛋白LOC677340 試劑盒二萜酯 98%（劇品）2-巰苯并噁唑 98%

假定蛋白LOC433328 試劑盒二氧馬錢酯苯酯 98%直接紅80 AR

假定蛋白LOC433328 試劑盒二乙-(+)-松脂酯二 Standard for GC，>99.8%（T)間乙 98%

髓樣分化因子初次應答因88(MYD88)試劑盒二乙長葉九里香內(nèi)酯二酯二 AR,99.5%辛二 99%

髓樣分化因子初次應答因88(MYD88)試劑盒二乙丁香樹脂酯二 CP,98%2,2,6,6-四哌啶-1-氧 98%

干擾素活化因205(Ifi205)試劑盒二乙松屬素酯二 分析標準品5-氟 99%

干擾素活化因205(Ifi205)試劑盒番石榴二疊氮磷二苯酯  97% 二酰 98%

組織相容性2-K1-K 區(qū)(H2-K1)試劑盒反式-異扁柏脂素疊氮三硅烷 93%氟硅銨 CP

組織相容性2-K1-K 區(qū)(H2-K1)試劑盒蜂蜜曲菌素3- 98%六氟鈦，水溶液 50%水溶液

白免疫球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)試劑盒覆盆子異磺酰酯 98%2-溴間二苯 97%

白免疫球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)試劑盒橄欖樹脂素三聚 99%溴乙芐酯 96%

C型凝集素結構域家族4成員E(CLEC4E)試劑盒高根二1,3-二氨胍鹽鹽 97%溴乙 CP,98.0%

C型凝集素結構域家族4成員E(CLEC4E)試劑盒高良姜萜內(nèi)酯氫鈉 95%溴乙 AR,98.5%(GC)

假定蛋白LOC677168 試劑盒根皮含柘樹咕噸 D二鈉 96%溴乙 分析標準品

假定蛋白LOC677168 試劑盒根皮含柘樹咕噸 L氫鈉 1.0 M in THF溴乙 Standard for GC,≥99.5% (GC)
FEP游離原卟啉ELISA試劑盒Rhodamine 123染色液可用于細胞凋亡檢測，Rhodamine 123 是一種細胞通透性的、陽離子的熒光探針，容易被有活性的線粒體攝取，沒有細胞毒性，Rhodamine 123由于帶陽離子所以當線粒體膜電位存在的時候就會透過細胞膜在活細胞的線粒體內(nèi)聚集，發(fā)出黃綠色熒光，而當膜電位下降的時候，聚集的Rhodamine 123 就減少，從而發(fā)光強度降低。

Rhodamine 123 常與Cy5和AMCA (Aminomethylcoumarin Acetate)等組合進行多色熒光分析,相互間無顏色交叉;分析細胞凋亡時,可用Rhodamine 123 來檢測線粒體的膜電位,而用NAO 來檢測線粒體結構的完整性。Rhodamine 123，可用于對許多種細胞進行染色，包括植物細胞和細菌。由于細胞內(nèi)ATP的量與Rhodamine 123的熒光強度之間有相關性，Rhodamine也可應用于檢測細胞內(nèi)的ATP。

儲存條件：4℃避光保存。長期保存-20℃避光保存。

有效期：六個月。

操作步驟：

1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7.溫育：操作同3。

8.洗滌：操作同5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。